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核酸外切酶III能够沿着双链DNA的3'→5'方向逐步切去单核苷酸。每一次的反应只切除最末的几个核苷酸以对双链DNA产生渐进缺失。该酶可以切割双链DNA，产生单链gap，但对单链DNA无活性。通常具有平末端或3'凹陷末端的DNA是最适底物。相反，3'突出末端抗该酶的切割，拮抗程度随3'突出末端的长度而改变，四碱基或更长的突出完全不能被切割。这种特性对于一端是抗性位点（3'突出端）一端是敏感位点（平端或5'突出端）的线性DNA分子，可以产生单向缺失。与BAL 3 Nuclease相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的Deletion制作。

本制品是把Exonuclease III基因(E.coli)在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的。

• 定点突变；
  
• 链特异性探针的制备；
  
• 制备用于双脱氧测序的单链底物。

在37℃，30分钟条件下，催化产生1nmol酸溶性总脱氧核糖核苷酸所要求的酶量定义为一个活性单位。

组分	3000U	15kU	100kU
Exonuclease III(100U/μL)	30μL	150μL	1mL
10×Exo III Reaction Buffer	1mL	5mL	10mL×4

保存：-20℃


1×Exo III Reaction Buffer：
10mM Bis Tris丙烷-HCl，10mM MgCl₂，1mM DTT，pH7.0@25℃。


1×Exo III Reaction Buffer，37℃温育。


70℃加热20分钟。


经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。


核酸外切酶III不能切割硫代磷酸的桥连。因此，可以通过引入一个硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端位点保护起来，再创建单向缺失。
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